A DOENÇA PULMONAR CRÓNICA OBSTRUTIVA (DPOC) AUMENTA A SUA MORBIDIDADE E MORTALIDADE ATÉ 2030, DE ACORDO COM QUEM A CAUSA GLOBAL DE MORTALIDADE DE 3 DR, IMPOSTANDO UM IMPOSTO SIGNIFICATIVO NO SISTEMA DE SAÚDE. É NECESSÁRIA UMA INVESTIGAÇÃO MAIS BÁSICA SOBRE OS MECANISMOS DE REMODELAÇÃO DA INFLAMAÇÃO NA COPD COMO NENHUMA DAS TRATAMENTOS FARMACOLÓGICOS ATUALMENTE POTEM A PROGRESSÃO INEXORÁVEL DA DOENÇA. Os inibidores da fosfodiesterase-4 (PDE4) REPRESENTAM UMA NOVA CATEGORIA DE ANTI-INFLAMATORES COM roflumilaste COMO PRIMEIRO DO SEU GRUPO ADOTADO PARA O TRATAMENTO DE EPOC._x000D_ OBJETIVO: Análise Farmacológica dos Efeitos Produzidos por Inibidores Seletivos da Empresa de Implementação PDE4 com Esteróides em Vias de Sinalização Inflamatória em Modelos Experimentais Humanos In Vitro Relevantes para a DPOC._x000D_ FARMACOS: INCUBADORES ISOFORMES SELETIVOS PDE4 VS. 2o ROFLUMILAST DE GENERACION, EM UTILIZAÇÃO CLÍNICA; ESTERÓIDOS (DEXAMETHASONE, BUDESONIDO). FARMACOS DE REFERÊNCIA PARA INTERESSE HEURISTICO (ANTIOXIDANTES, N-ACETIL-L-CISTEINE) E CLÍNICOS (AGONISTAS DE LONGA DURAÇÃO-2). CONCENTRAÇÃO A UTILIZAR EM NÍVEIS DE PLASMA DE GANHA. A utilização de SIRNA para ISOFORMAS CANCELARES PDE4 permitirá CONTRATAR OS RESULTADOS DOS INIBITORES SELECTIVOS._x000D_ MODELOS DE EXPERIMENTAÇÃO:_x000D_ 1) LEUCOCITO/INTERAÇÕES INDEPENDENTES. Câmara de fluxo. VIDEOMICROSCÓPIA. ATIVAÇÃO CELULAR EM RISCO SOBRE O FUMO DE TABACO. DETERMINAÇÃO DE ICAM1, VCAM-1, E-SELECTINA, NOX2, NOX4, NOX5, IL-8, GM-CSF, MCP-1, ISOFORMAS PDE4, ERK1/2 E P38 EM CÉLULAS ENDOTEIS PULMONARES HUMANAS E EXPRESSÃO DE CD11B/CD18 E SUPERÓXIDO DE ANION EM NEUTROFILOS E MONÓCITOS DE NÃO SANITÁRIOS, FUMANTES SEM COPD E PATIENTES COM COPD MODERADO-SEVERE. _x000D_ 2) CÉLULAS EPITELIAIS BRONQUIAIS HUMANAS. ATIVAÇÃO COM LPS E MEDIÇÃO DE CITOQUINAS/CHEMOQUINAS (IL-8, GM-CSF, IL-1, IFN, CCL5, CXCL10, CXCL11) E GÉNEROS ANTI-INFLAMMATORIAIS INDUZIDOS POR ESTERÓIDOS (GILZ, RGS2, MKP-1, CD200, CRISPLD2), SUBTIPOS PDE4 (PDE4A A D), PI3K, MUC5AC, CILDO DE DEUBIQUITINASA E P-P65 E PKA-C1 EVOCADOS PELA OVERREGULAÇÃO PDE4B. Measure OF THE RESPONSE OF GLUCORTICOIDE (GRE) AND EXPRESSION OF STEROICE RECEPTORS (GR and GR) in BEAS2B TNF-ACTIVATED CELULAS._x000D_ 3) EPITELY TRANSICATION to TGF- INDUCED Mesenchyma, ISTUDIATED AS REMODELING PATRON IN EPOC with EPITELIAL Markers Measurement (E-CADHERINA, ZO-1, CK18) And Mesenchymals (COLAGEN 1, -ACTINE, VIMENTINE), PDE4 ISOFORMAS, NOX1, NOX2, NOX4, NOX4 Y -CATENIN, GTP-RAC1, P-AKT, P-ERK1/2, and P-SMAD3. _x000D_ em EXPERIMENTOS ADICIONAIS Um EFEITO VIVO DE INIBITORES PDE4B EM RATONS C57BL6J WT e KO para PDE4B e PDE4D será estudado. _x000D_ Ética: A APROVAÇÃO SERÁ OBTIDA PELO COMITÉ DE ÉTICA INSTITUCIONAL. O NÚMERO DE EXPERIÊNCIAS OPTIMISEARÁ A UTILIZAÇÃO DE AMOSTRAS HUMANAS. _x000D_ Inovação e transferência de conhecimentos: O nosso laboratório contribuiu significativamente para a prova de conceito e doseamento do ROFLUMILAST, a primeira droga inibidora PDE4 autorizada para o tratamento de várias copas com exames frequentes. (EMEA, 2010; FDA, 2011)._x000D_ CONCLUSÕES: Os resultados deste projecto contribuirão para um melhor entendimento do efeito anti-inflamatório e anti-remodelador dos inibidores ISOFORMES seletivos PDE4 VS. ROFLUMILAST, bem como para a base da sua associação com o LABA e os esteroides inalados no tratamento farmacológico da DPOC.
