A Espanha é um dos países europeus com a maior população de cavalos. A QUALIDADE GENÉTICA DAS NOSSAS RAÇAS, INCLUINDO A RAÇA PURA ESPANHOLA, É INTERNACIONALMENTE RECONHECIDA. Presentemente, há um interesse crescente no desenvolvimento e comercialização de técnicas de reprodução apoiadas no cavalo. A INDÚSTRIA DO SÉMEN EQUIPADO E A PRODUÇÃO E TRANSFERÊNCIA IN VIVO DE EMBRIÕES SÃO TÉCNICAS BEM DESENVOLVIDAS, CONTRATANTES COM O EQUIPADO IN VITRO PRODUÇÃO DE EMBRIÕES. A fertilização in vitro (FIV) permite a produção de embriões de uma forma mais eficaz e eficiente em termos de custos em comparação com os sistemas IN VIVO, mas, portanto, não há protocolos repetíveis para a FIV convencional no mesmo tempo. A inconsistência da fertilização in vitro com equídeos e o facto de nunca ter sido estabelecida comercialmente deve-se, pelo menos em parte, ao facto de a fisiologia da interacção esperma-oócito e alguns aspectos básicos da fertilização ainda não estarem bem compreendidos nestas espécies. Por outro lado, a fisiologia do fenômeno que precede a fertilização varia amplamente entre o cavalo e outras espécies domésticas. Foi publicada uma vasta gama de estudos sobre a fertilização in vitro de equídeos, apesar de os resultados serem incoerentes. Mesmo quando os oócitos de equídeo podem ser amadurecidos no laboratório e o espermatozoide pode ser capturado in vitro, a co-incubação de jogos não resulta em fertilização consistente ou desenvolvimento de embriões. Um trabalho anterior demonstrou que a exposição de OÓCITOS EQUINOS MATURADOS IN VITRO a RESULTADOS HOMOLOGOSOS FLUÍDOS OVIDUTAIS em TAXAS DE FERTILIZAÇÃO MELHORADAS. Noutras espécies, verificou-se que a composição dos fluidos ovulatórios pré e pós-ovulatório é diferente e que o seu efeito nos resultados da fertilização in vitro também varia. No caso do cavalo, o volume de fluido que pode ser obtido a partir de um único ovíduto é disperso e obtido a partir de marés post-mortem, pelo que a proibição de abate de cavalos noutros países resultou na interrupção destas linhas de investigação. Portanto, o nosso objectivo a longo prazo é desenvolver um protocolo de fertilização in vitro de equídeo fiável que permita a optimização das taxas de fertilização actuais e o nascimento de uma pulverização in vitro viável. OBJECTIVOS ESPECÍFICOS: 1 CARACTERIZAR A COMPOSIÇÃO DO FLUIDO OVIDUCTAL DO EQUIPAMENTO PRÉ E PÓS-OVULATÓRIO; 2 Desenvolver dois meios de fertilização para a fertilização in vitro de equídeos, com base na composição pré e pós-ovulatória do fluido ovulatório; 3 OPTIMIZAR OS PROTOCOLOS EQUIPADOS DA FIV COMPARAÇÃO DO EFEITO DE FLUIDO OVIDUCTAL NATURAL E DOS DOIS MEIOS SINTÉTICOS SOBRE A CAPACITAÇÃO DO ESPERNO EQUIPADO; 4 OPTIMIZAR O PROTOCOLO EQUIPADO DE FIV COMPARAÇÃO DO EFEITO DE FLUIDO OVIDUCTAL NATURAL E DOS DOIS MEIOS SINTÉTICOS (PRE E PÓS-OVULATÓRIO) SOBRE O ÓCITO EQUIPADO MATURADO IN VITRO; 5 DESENVOLVIMENTO DE UM PROTOCOLO EQUIPADO EFICIENTE DE FIVAÇÃO COM FLUIDO OVIDUCTAL NATURAL PRÉ-E PÓS-OVULATÓRIO E DOS DOIS MEIOS DE COMUNICAÇÃO SINTÉTICOS; 6 AVALIAR A TAXA DE PREGNÂNCIA DOS BLASTOCISTAS PRODUZIDOS APÓS A TRANSFERÊNCIA TRANSCERVICAL PARA MARES RECEPTORES (DIA 25 DE PREGNÂNCIA). Portanto, nosso objetivo é tornar disponível à comunidade científica e à indústria de equipamentos um protocolo de fertilização in vitro eficiente, aceitável e repetível, bem como melhorar a eficácia produtiva e reprodutiva dessas espécies.