Como parte do projeto, está previsto desenvolver e desenvolver um candidato inovador para um medicamento que induza a degradação da proteína MCL-1 na via do proteassoma. A proteína anti-apoptótica MCL-1 é um membro da família da proteína Bcl-2, que é sobre-expressa em muitos tipos de cancro. A superprodução de MCL-1 interrompe o equilíbrio de proteínas anti e pró-apoptóticas, entre outras coisas, e é um fator de sobrevivência importante para o cancro. Além disso, as linhas de células tumorais estão sujeitas à seleção clonal para células com níveis elevados de MCL-1, resultando em resistência à quimioterapia e terapias direcionadas. Diminuir os níveis de MCL-1 por terapias antissenso ou siRNA confirma o papel oncogénico desta proteína e abre novas oportunidades para terapias de cancro direcionadas. O candidato a medicamento, desenvolvido como parte deste projeto, induzirá a ubiquitinação do MCL-1 e, em seguida, a sua degradação do proteassoma, o que levará a um efeito terapêutico. A inovação da degradação proteica direcionada permite eliminar todas as funções que determinam o desenvolvimento da doença, que no caso da degradação proteica MCL-1 é o oposto completo da farmacologia dos inibidores deste alvo molecular. A inibição do MCL-1, além de bloquear apenas o papel antiapoptótico, também leva ao seu forte acúmulo nas células, impedindo assim a dosagem da droga e levando à formação de efeitos colaterais graves. Na primeira fase do projeto, foi desenvolvida uma nova classe de degradadores MCL-1 de pequenas moléculas.Os compostos sintetizados foram caracterizados de forma contínua por testes biofísicos, incluindo FP, SPR, HTRF e utilizados na cristalografia. A atividade de degradadores em sistemas celulares foi avaliada utilizando-se, entre outros, o teste de viabilidade, o teste de medida da atividade da caspase em placa, os testes de avaliação de permeabilização NanoBRET e o teste de degradação Western Blotting. O potencial dos compostos selecionados foi avaliado em células primárias animais e humanas, ou seja, em leucócitos isolados do sangue. Foram também realizados estudos de ADME e farmacocinética, que permitiram determinar os parâmetros-chave dos sistemas de compostos in vivo e ex vivo. A segurança dos compostos selecionados foi pré-avaliada utilizando testes de genotoxicidade, a capacidade de inibir a atividade das enzimas da família das proteínas CYP, os efeitos nos mais prováveis fora dos alvos e a identificação de metabolitos. Foi também realizada uma avaliação preliminar da cardiotoxicidade in vitro e in vivo durante estudos toxicológicos que incluíram a determinação da dose máxima admissível (DTM) em ratos e macacos. O efeito farmacodinâmico e a eficácia de compostos selecionados foram determinados em modelos in vivo - em ratos com células cancerosas humanas implantadas. A segunda fase do projecto consistirá em: complementar os dados farmacológicos e toxicológicos de segurança do candidato às BPL. Serão realizados ensaios in vitro: hERG e 3T3 NRU, bem como estudos in vivo de 28 dias na norma BPL - tanto em espécies de roedores como em espécies superiores, com avaliação de: mortalidade, sintomas clínicos, alterações no peso corporal, consumo alimentar, patologia clínica, órgãos macroscópicos, histopatologia completa, bem como avaliação da potencial cardiotoxicidade (no caso de animais de espécies superiores). b) síntese do candidato a fármaco numa escala de quilogramas na norma BPF, juntamente com a especificação do produto final incluído no certificado de análise elaborado para o mesmo. O composto ativo produzido em uma escala de quilograma no padrão GMP, na fase II do projeto, será purificado usando um método de cristalização previamente desenvolvido. A forma polimórfica para a forma cristalina resultante do lote final do composto ativo também será confirmada, juntamente com a medição da decomposição de partículas do produto final, e serão realizados estudos de estabilidade. c) Preparação da documentação do novo composto candidato necessária para o início dos ensaios clínicos de fase I. d) Execução dos ensaios clínicos de fase 1a