O projecto apresentado é dirigido à elucidação como, segundo circunstâncias, as proteases são estrutural e espacialmente reguladas às proteínas essenciais da replicação de DEGRADE. A investigação concentrar-se-á na protease bacteriana de Lon e nos seus cofactores que contêm fosfato, contribuindo para as actividades de protease. Analisaremos o Lon de espécies bacterianas não investigadas até agora neste aspecto, bem como substratos Lon conhecidos e recentemente identificados essenciais para a replicação do ADN bacteriano. Ao aplicar experimentos in vitro e in vivo, incluindo análise em tempo real, monomolécula e monocélula com uma variedade de proteínas, substratos e cofatores de Lon, esperamos descrever os efeitos específicos da espécie, específicos do substrato e gerais sobre o Lon e relacioná-los com as condições de crescimento. O AFM de ponta e o cryo-EM serão utilizados para a descrição de complexos de Lon com cofactores e substratos. As nossas investigações podem fornecer dados sobre o Lon como um novo alvo para novas estratégias antimicrobianas.